高效液相色谱是色谱的一个重要分支。分离柱中的组分后,进入检测器进行检测,从而实现样品分析。该方法已成为分离分析技术在化学、医药、工业、农学、商检和法定检验等领域的重要应用。
常用的高效液相色谱检测器包括紫外吸收、荧光、差示折射、化学发光等。
1、紫外可见吸收检测器是高效液相色谱中应用最广泛的选择性检测器。其工作原理是待测成分对特定波长的UV或可见光具有选择性吸收,适用于测定在UV或可见光区域具有吸收的溶质。检测器输出信号(即吸光度和待测成分浓度)之间的关系符合朗伯-比尔定律。紫外-可见吸收检测器具有灵敏度高的优点;选择性好;对流量和温度变化不敏感,适合梯度浸出;它具有很宽的线性范围,可以同时检测主成分和痕量成分。
2、差示折光检测器是高效液相色谱分析仪中第二种广泛使用的通用检测器。其工作原理是连续监测纯流动相和包含样品的流动相之间的折射率差。只要纯流动相的折射率与待测成分的折射率不同,检测器就会发出检测信号,其响应信号的大小与样品的含量成正比。只要溶质和流动相的折射率相差0.1,就可以检测到1mg/ml溶质。
3、荧光检测器荧光检测器是一种高灵敏度的选择性检测器,广泛应用于高效液相色谱。其工作原理是:具有特殊结构的化合物在受到紫外光激发后,可以发射比吸收的紫外光波长更长的光,即荧光。在某些条件下,荧光强度与能够产生荧光的物质的浓度呈线性关系。荧光灯可以检测到许多荧光物质。一些非荧光物质可以通过化学衍生技术来生成荧光衍生物,或通过荧光检测器来检测。
4、电导检测器电导检测器是一种选择性检测器,是离子色谱仪中应用最广泛的检测器。其工作原理是根据物质在某些介质中电离产生的电导变化来测量电离物质的含量。
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